規格: 切片 β-半乳糖苷酶是一種常用的報告基因分子,通過原位染色,在普通的光學顯微鏡下就可以用于檢測到β-半乳糖苷酶的表達。
實驗步驟:
1.用 2 mL D-PBSA 液洗滌細胞(如在 6 孔培養板上)。
2.用 1 mL 固定液于室溫下固定細胞 5 min。
3.用 2 mL D-PBSA 洗滌細胞 2 次。
4.將 1 mL 底物/染色液加入到每個培養孔內,37℃ 孵育 2 h。
5.用 2 mL D-PBSA 液沖洗每孔細胞,在倒置顯微鏡下觀察細胞,計數藍染(β-gal 陽性)細胞。
6. 培養板的儲存。在每孔加 1 mL 含 10% 甲醛的緩沖鹽溶液,室溫下固定 10 min,然后用緩沖鹽溶液洗滌細胞,4℃ 儲存 緩沖鹽溶液。
結果展示:
被β半乳糖苷酶法染色的衰老細胞
注意事項:
1. β-Gal Fixative有一定的腐蝕性和氣味,操作時請注意防護。
2.β-半乳糖苷酶染色反應依賴于特定的pH條件,不能在二氧化碳培養箱中進行染色反應。用于細胞培養的二氧化碳培養箱 中較高濃度的二氧化碳會影響染色工作液的pH值,而導致染色失敗。
3. 配制染色工作液時需使用聚丙烯(polypropylene)容器或玻璃容器,不宜使用聚苯乙烯(polystyrene)容器。但染色時 可以在聚苯乙烯(polystyrene)容器中進行,例如普通的6孔板就可以用作染色的容器。
收費標準/服務周期/提供結果:
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