實驗技術簡介:
Franna Nissl (1860-1919) 1892年創立了Nissl染色法,以發現Nissl小體和Nissl變性而聞名。常用的堿性染 料有Cresyl violet (焦油紫,甲.酚紫,克紫);thionine (硫荲);tolridine blue (甲苯.胺藍)等。 尼氏體為嗜堿性物質,又稱嗜染質,光鏡 下呈斑塊狀或細粒狀散在均勻分布。在一些大型的運動神經元, 尼氏體大而多,宛如虎皮花紋,又稱“虎斑”。電鏡下,尼氏體由大量平行排列的粗面內質網和其間 的游離 核糖體組成。尼氏體是神經元胞體細胞質的特征性結構之一,神經元胞質另外一特征性結構為神經原纖維。
技術原理:
正常的神經細胞都含有一定數量的尼氏體,它們主要分布于神經細胞 的漿中,形狀有大有小,如三角形, 有的為橢圓形。這些物質能被大部分的藍色染料所染色,這些染料如焦油堅牢紫(Cresyl fast violet)亞 甲藍(methylene blue)甲苯.胺藍(toluidine blue)硫董(thionin)等鈄其染為藍色。但是,當神經細胞 受傷后,胞質內 的尼氏體更可發生變化,嚴重的可消失。
實驗操作流程:
1、切片脫蠟至水
2、用焦油堅牢紫水溶液浸染20-30分鐘
3、水洗
4、用95%酒精分化
5、無.水.酒.精脫水,二甲苯透明,中性樹膠
實驗結果:
神經細胞單位:
紫-藍色 細胞核:紫-藍色 尼氏體:紫-深藍色
結果展示
神經元尼氏(nissl)染色
客戶提供:
1、組織樣品:新鮮組織放入液氮或-80度保存,組織不少于100mg;
2、培養細胞:通過細胞計數取不少于2×106個細胞于EP管,加入0.5ml生理鹽水或蛋白保護劑,混勻后保 存于冰箱(-80℃,避免反復凍融);
3、血液細胞標本:以抗凝管保存血樣或以淋巴細胞分離液分離細胞后加入0.5ml生理鹽水或蛋白保護劑, 保存(-80℃可長期保存,避免反復凍融);
4、血清或細胞培養液標本:離心去掉雜質后取上清入EP管,保存(4℃可保存15-20天,-80℃可長期保 存,避免反復凍融);
5、石蠟切片,冰凍切片以及細胞爬片,涂片等。
6、樣本運輸:可選擇以下任何一種方式寄送標本 組織樣本、細胞樣本以干冰運輸或加入蛋白保護劑后,加冰袋寄送; 細胞樣本也可直接寄送培養瓶(密封保證不污染、培養液不漏出); 血清或上清液直接加冰袋寄送(送視路程遠近2-3天可到達)。
交付標準:
1、圖片;
2、完整項目報告(材料、試劑、儀器、方法、數據分析、實驗結果)。
其他:
應用酒精分化切片,要迅速,防止過度分化,將切片上的顏色全部脫掉