去勢（切除卵巢/睪丸）致骨質疏松 卵巢是卵子發育和激素產生的器官，其受到下丘腦和垂體促性腺激素的雙重調控(卵泡雌激素FSH)和黃體 生成素(LH)。LH是在下丘腦垂體促性腺激素釋放激素(GnRH)的作用下以脈沖的方式分泌，在正反饋作用 下誘發排卵所需的LH峰。在卵巢，FSH受抑制素的雙重負反饋調節，并受到性激素尤其是雌激素、孕激素 的負反饋調節。雌激素在調節骨代謝及維持內環境的穩定性方面有著重要的作用，雌激素水平低下被認為 是導致骨質疏松癥的主要原因。 

       雌性大鼠雙側卵巢摘除是一個較成熟的動物模型，可以成功建立模擬雌激素缺乏而導致的骨質疏松動物模型。這也為研究雌激素缺乏對人體其他系統的損害奠定了基礎。雌激素是體內重要的激素，它對骨代謝有 著重要的作用。在對小鼠進行去勢手術后，機體處于一種低雌激素的微環境，骨轉換過程加速，骨代謝加 強，成骨細胞量降低，破骨細胞活躍，從而導致機體骨量丟失以及正常生理結構的破換，容易導致骨質 疏。 

研究顯示雌激素缺乏后，小鼠骨髓間充質細胞成骨能力顯著降低，這與骨質疏松發生有關；而且雌激素缺乏后，會加重牙周炎的程度，這與雌激素缺乏后降低了牙周膜成纖維細胞的增殖與成骨能力有關。 

       許多已知的骨代謝相關因子都受到雌激素的調控。在成骨細胞，雌激素能夠促進代謝生長因子IGF-I 的合 成與分泌，同時抑制骨吸收相關因子，如白介素-1（IL-1）及白介素-6（IL-6）、前列腺素、腫瘤壞死因子 (TNF)等。雌激素也可以促進骨保護素（OPG）的合成與分泌，而這種激素在抑制破骨細胞的功能方面有 著重要的作用。多方證據表明，在卵巢切除術后或絕經后，由于骨小梁的快速缺失而導致骨質疏松。 

1.實驗動物 SPF級Balb/c小鼠，健康，雌性未孕，4~6W，體重為18g~20g. 

2.實驗分組 實驗分六組：正常對照組、模型組、陽性藥組、受試藥組三個劑量組，每組15只動物。 

3.實驗周期 12W 

建模方法 

1.小鼠3%戊BA比妥鈉40mg/kg腹腔麻醉后仰臥，腹部脫毛。 

2.在無菌條件下于腹股溝水平沿腹中線剪開皮膚及肌層，暴露腹腔。 

3.分離子宮并摘除卵巢，清理傷口后分兩層縫合皮膚及基層，待小鼠清醒后，將其放回潔凈籠具后放回飼 養室飼養，定期觀察小鼠狀態及死亡情況并做好記錄。 

4.術后3天，每只小鼠每天注射4萬單位青霉素，防止感染。 

5.對照組僅摘除卵巢周圍約1 g脂肪，而保留卵巢，其余處理相同。 

6.12W取材，X線測量各組小鼠骨密度（bone mineraldensity ，BMD），再腹腔注射麻醉，摘眼球取血， 室溫靜止2h，4℃離心機3000r/min離心10min，分離出上層血清，置-80℃冰箱保存備用。取小鼠脛骨標本 用于病理學檢測。

模型的評價 

1．卵巢去勢后小鼠體重、雌二醇及骨密度變化 去勢組大鼠體重增長迅速，活動能力下降，毛色缺乏光澤而略灰暗，而對照組小鼠體重增加緩慢，毛色光 亮，活動正常。去勢組雌二醇水平及股骨 BMD 顯著下降。 

2 . 骨形態學染色

取各組小鼠脛骨標本，置入 10%中性甲醛緩沖固定液中（pH=7.2-7.4，4°C）固定 24-48h，再 經 10%EDTA-2 Na 緩沖液（pH=7.4，4°C）脫鈣，隔5-7d 更換脫鈣液；脫鈣完全后，梯度乙醇脫水，二 甲苯透明，縱向石蠟包埋，5um 連續切片，常規 HE 染色。 對照脛骨骨小梁密集，相互交織成網狀；模型組骨小梁數目明顯減少，骨小梁變薄，呈斷裂狀。 

3 .細胞因子的檢測 有研究發現，雌激素的缺乏將導致機體自發的啟動應激反應。去勢后血清中IL-6 、IL-8 、IL-1β、TNFα 的表達量增加，可以用ELISA 法檢測。

小鼠卵巢去勢骨質疏松癥模型手術大體操作圖 

維甲酸致骨質疏松模型 

造模機制 

維甲酸是維生素A的衍生物，具有與維生素A相似的藥理作用，臨床上主要用于各種皮膚科疾病的治療，但 其伴有骨質疏松副作用。過去的研究表明，維甲酸能激活機體內破骨細胞促進骨吸收，但對成骨細胞活性 無抑制作用，對骨形成及骨基質的礦化過程也無明顯影響，最終使機體內骨重建處于骨吸收大于骨形成的 負平衡狀態，從而導致動物出現骨質疏松。 

實驗方法 

3個月齡雌性大鼠每天按70mg/kg體重的劑量口服維甲酸(retinoic acid)，連續14d，隨后14d維甲酸改為生 理鹽水。動物常規飼養，自由飲水及進食。于造模開始后第29日處死動物，取其脛骨于固定液中固定，常 規脫鈣，石蠟包埋，作連續切片，光鏡下觀察。 

模型特點

口服維甲酸3d后，模型大鼠食量明顯減少；至第14日時動物體重明顯減輕，活動減少，并可見拱背豎毛。 模型大鼠脛骨近心段松質骨(骨小梁)骨量及形態發生明顯改變，骨小梁面積百分數、密度顯著減少，骨小 梁間隙增大。模型動物骨組織切片形態計量結果顯示，脛骨中段密質骨面積百分數也明顯減少，骨髓腔面 積百分數增大，反映破骨細胞活性與功能的骨內膜面骨吸收周長百分數明顯增高。本模型制作方法簡便， 造模時間短，模型成功率高，動物骨質疏松表現典型，易于開展給藥觀察。 

需確認的信息 

1.模型種屬（大鼠還是小鼠或是其他種屬） 

2.動物體重有無要求，年齡有無要求 

3.雌雄有無要求 

4.模型構建具體方案 

5. 取材要求（采血、取組織樣本）