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            腎盂腎炎動物模型 泌尿系統模型

            慢性腎盂腎炎動物模型 

            實驗方法 

            利用傾斜平板法制備100000000/ml及1000000/ml兩種濃度大腸埃希菌(O111B4)菌液待用,使用前測集落形成單位(CFU)值 核實濃度。體重200g左右雄性大鼠,術前常規禁水24h,先用細線扎住大鼠陰莖。在乙mi吸入麻醉下,動物仰臥固定于手術 板上,常規消毒腹部皮膚并去毛,沿下腹部正中切開,充分暴露左側輸尿管及膀胱,在輸尿管中段用10號半圓針、0號黑線 向側腹部穿針,暫不結扎。用注射器向膀胱內注射100000000/ml濃度的菌液,每只注射量約0.5ml左右,常規手術關閉腹 腔。以適度松緊結扎側腹部黑線(24h后解除),松開扎住陰莖的細線,術后恢復正常飲水與進食。分別于實驗預定時間作腎 功能及血生化指標測定;同時麻醉處死動物,取兩側腎臟,一半組織經固定液固定,作常規組織切片,光鏡下病理檢查;另 一半組織勻漿后作細菌培養。處死動物前膀胱穿刺抽取尿液作細菌培養。 

            模型特點 

            模型動物術后90d時,均表現為尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)/尿肌酐明顯升高;模型制作過程中,24h尿蛋白定量無 明顯增加。血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)分別于30、60、90d檢測無明顯升高。術后第7日時,模型動物膀胱尿標本及左腎組 織細菌培養為陽性,麥康凱培養基上為不透明紅色圓形菌落,血平板上則為稍凸、中等大小、邊緣整齊、不透明灰白色圓形 菌落;鏡下為革蘭氏染色陰性的粗短桿菌。細菌培養高陽性率可持續保持到術后第60日。肉眼觀察第7日時模型動物左側腎 臟明顯腫大,其表面可見粟粒樣膿腫,部分已融合成片;腎縱切面有膿腫形成;第15日時腎縱切面可見較多膿液,腎孟明顯 擴張;第30日時腎臟腫脹部分減輕,外觀仍見膿腫;第60日腎臟體積腫大減輕;第90日時左腎可見明顯皮質瘢痕形成,表 面凹凸不平,體積縮小。肉眼觀察未見右。腎有化膿灶或瘢痕形成,但可見右腎代償性增大。鏡下病理學觀察顯示,病變急 性期左腎腎盂黏膜上皮細胞壞死、脫落,腔內積膿,腎實質彌漫性化膿灶,小管腔內可見白細胞管型;7~15d時淋巴細胞 浸潤明顯;30d可見間質纖維組織增生,腎盂處瘢痕形成;60d時部分腎小球出現纖維化;90d時可見間質纖維化,并有灶性淋巴細胞浸潤。 



            急性腎盂腎炎動物模型 

            單純感染模型 

            實驗方法 

            體重為200g左右大鼠,禁止飲水24h后,事先用細線扎住大鼠陰莖。在乙mi吸入麻醉下,動物仰臥固定手術板上,常規消毒 腹部皮膚并去毛,沿動物下腹部作正中剪開,充分暴露膀胱,用注射器直接向膀胱內一次性注射濃度為1000000/ml的大腸 埃希菌(O111B4)菌液,每只注射量約0.5ml,手術縫合切口,關閉腹腔。1h后松開扎陰莖細線。術后恢復動物正常飲水與進 食。分別于預定時間處死動物,取其兩側腎臟,小心去除腎包膜;然后縱向切開腎臟,一半勻漿后行細菌培養,另一半置于 固定液中固定,作常規組織切片,HE染色,光鏡下觀察。同期膀胱穿刺作尿液細菌培養。 

            模型特點 

            術后3d尿液能培養出細菌,于麥康凱培養基上生長出紅色圓形菌落;至7d時仍有80%的動物細菌培養陽性,15d時則僅有少 數動物細菌培養陽性。腎組織細菌培養大部分動物雙腎細菌培養為陽性,部分動物為一側腎臟培養陽性。至第15日時,仍有 少數腎臟細菌培養陽性。大體標本肉眼觀察可見模型動物雙腎體積均有不同程度增大,腎表面無明顯膿腫;其縱切面可見腎 盂擴張,黏膜充血,腎皮質、髓質分界不清。鏡下病理學觀察顯示,3d時腎盂黏膜下及間質區以中性粒細胞為主伴有少量淋 巴細胞的炎癥細胞浸潤,毛細血管擴張、充血,間質水腫。第7日時腎盂黏膜下及間質內可見淋巴細胞灶性浸潤,并可見少 量嗜酸性粒細胞,間質毛細血管擴張;至15d時仍可見間質淋巴細胞浸潤,毛細血管增生、擴張,并有少量纖維母細胞、肉 芽組織形成。 




            手術+感染模型 

            實驗方法 

            大腸埃希菌(O111B4)菌液的制備:將菌種接種于肉湯培養基,37℃、5%CO2孵箱內孵育12h,利用傾斜平板法制備 1000000/ml濃度菌液待用。體重為200g左右雄性大鼠,禁止飲水18h后經腹腔按30mg/kg體重劑量注射戊巴bi妥鈉麻醉。動 物仰臥固定手術板上,常規消毒腹部皮膚并去毛,鋪無菌手術巾。沿下腹部作長約2cm正中切口,逐層切開腹壁進入腹腔, 充分暴露左側輸尿管及膀胱;用4號縫合絲線從中段輸尿管兩旁分別向側腹部穿針并引出縫合線,兩針盡量保持相近,暫不 結扎,用動脈夾夾閉陰莖,用 TB針向膀胱內緩慢注入0.75ml菌液。然后拉緊腹壁外面的縫合線兩端,以適當松緊度“結扎” 輸尿管。逐層縫合腹壁切口,松開陰莖動脈夾,術后動物恢復常規飼養,自由飲水和進食。手術后20h,拆去腹壁外面輸尿 管結扎線,使輸尿管重新開放。分別在規定的時間用動脈夾夾住大鼠陰莖后,用乙mi麻醉,仰臥于手術臺上,無菌條件下開 胸、開腹,抽出心血和尿液,切取左右腎臟和脾臟,作肉眼檢查、細菌培養及病理組織學檢查。 

            模型特點 

            術后第3日模型動物膀胱尿液即能培養出細菌,于麥康凱培養基上生長出紅色圓形菌落。第7日時細菌培養陽性率分別可高達 80%以上,這種高陽性率可持續保持15d以上。結扎一側腎臟腎組織細菌培養也有細菌生長,未結扎一側腎臟細菌培養陽性 少見,且持續時間較短。心血和脾臟細菌培養均為陰性。肉眼觀察模型動物左腎體積較右腎有不同程度增大,左腎表面可見 數量不等的微小膿腫,個別腎臟有突出腎表面的較大膿腫;切面腎盂擴大,黏膜充血、腫脹,腎盂內有膿性分泌物,有的腎 切面可見微小膿腫或錐形炎癥灶。右腎外觀和切面未見明顯異常。鏡下病理觀察顯示,術后3d模型動物左腎腎盂腎盞黏膜充 血腫脹,有的可見黏膜表面有局灶性膿性分泌物,黏膜下可見大量中性粒細胞浸潤。腎間質血管充血,多數腎臟可見膿腫, 在一些腎乳頭部尚可見大小不一的錐形炎癥灶;腎小管不同程度擴張,以遠曲小管為重;小管周圍有較多中性粒細胞浸潤, 部分腎小管上皮細胞壞死、脫落,管腔內可見膿細胞及少量管型。腎小球無明顯損傷。術后7d動物左腎間質炎癥細胞減少, 腎盂黏膜下、腎小管周圍可見以中性粒細胞為主,伴有較多淋巴細胞和單核細胞的炎癥細胞浸潤;膿腫灶邊緣出現較多成纖 維細胞,灶內除有中性粒白細胞外,尚有大量淋巴細胞、單核細胞。腎盂黏膜充血腫脹減輕,黏膜下中性粒細胞細胞浸潤明 顯減少,出現較多單核細胞、淋巴細胞。右腎組織無明顯組織形態學改變。 


            需確認的信息 

            1. 模型種屬(大鼠還是小鼠或是其他種屬)

            2. 動物體重有無要求,年齡有無要求

            3. 雌雄有無要求

            4. 模型構建具體方案

            5. 取材要求(采血、取組織樣本)


            收費標準/服務周期/提供結果: 

            歡迎咨詢詳談,我們會根據您的方案及需求制定詳細的服務協議。

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