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            線粒體ROS生物含量檢測-流式

            實驗原理 

            活性氧檢測(Reactive Oxygen Species Assay Kit)是一種基于熒光染料DCFH-DA(2,7-Dichlorodi -hydrofluorescein diacetate)的熒光強度變化,定量檢測細胞內活性氧水平的最常用方法。 

            DCFH-DA本身沒有熒光,可以自由穿過細胞膜。進入細胞內后,可以被細胞內的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不會通透細胞膜,因此探針很容易被積聚在細胞內。細胞內的活性氧能夠氧化無熒光的DCFH生成有熒光的DCF。綠色熒光強度與活性氧的水平成正比。在最大激發波長480 nm,最大發射波長525 nm處,使用熒光顯微鏡,流式細胞儀或激光共聚焦顯微鏡等檢測熒光信號。Rosup為活性氧陽性誘導藥物,根據其熒光信號強度,可分析活性氧的真正水平。 

            檢測方法 

            原位裝載探針法:激光共聚焦顯微鏡直接觀察,或收集細胞后用熒光分光光度計、熒光酶標儀或流式細胞儀檢測。 收集細胞后裝載探針:用熒光分光光度計、熒光酶標儀或流式細胞儀檢測,也可以用激光共聚焦顯微鏡直接觀察。 

            注意事項 

            1、探針裝載后,一定要洗凈殘余的未進入細胞內的探針,否則會導致背景較高。 

            2、探針裝載完畢并洗凈殘余探針后,可以進行激發波長的掃描和發射波長的掃描,以確認探針的裝載情況是否良好。 

            3、盡量縮短探針裝載后到測定所用的時間(刺激時間除外),以減少各種可能的誤差。 

            4、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。 


            收費標準/服務周期/提供結果: 

            歡迎咨詢詳談,我們會根據您的方案及需求制定詳細的服務協議。 

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