線粒體膜電位檢測 

1. 線粒體膜電位：是維持線粒體進行氧化磷酸化、產生三磷酸腺苷的先決條件, 膜電位的穩定有利于維持細胞的正常生理功能。

2. 檢測方法：JC-1熒光探針法（熒光顯微鏡觀察）、流式檢測

線粒體跨膜電位DYmt的下降，被認為是細胞凋亡級聯反應過程中最早發生的事件，它發生在細胞核凋亡特征（染色質濃縮、DNA斷裂）出現之前，一旦線粒體DYmt崩潰，則細胞凋亡不可逆轉。

線粒體跨膜電位的存在，使一些親脂性陽離子熒光染料如Rhodamine 123、3，3-Dihexyloxacarbocyanine iodide[DiOC6 

（3）]、Tetrechloro-tetraethylbenzimidazol carbocyanine iodide[JC-1]、Tetramethyl rhodamine methyl ester（TMRM）等可結合到線粒體基質，其熒光的增強或減弱說明線粒體內膜電負性的增高或降低?！　?nbsp;

一、方法 

將正常培養的細胞和誘導凋亡的細胞加入使用終濃度為Rhodamine 123（1mM）或終濃度為DiOC6（25nM），JC-1 （1mM），TMRM（100nM），37°C平衡30min，流式細胞計檢測細胞的熒光強度?！　?nbsp;

二、注意事項 

1、始終保持平衡染液中pH值的一致性，因為pH值的變化將影響膜電位?！　?nbsp;

2、與染料達到平衡的細胞懸液中如果含有蛋白，他們將與部分染料結合，降低染料的濃度，引起假去極化。 熒光探針JC-1是一種陽離子型的親脂性染料，能夠自由穿過細胞膜，隨細胞膜電位的變化而在膜兩側保持動態平衡。其特點是線粒體膜電位低時濃度低，主要以單體形式存在，488nm激發時最大發射波長為527nm，呈綠色熒光，胞漿相對線粒體為低電位，形成流式圖中所有細胞FL1均為陽性；膜電位高時濃度高形成聚集體，488nm激發時的最大發射波長為590nm，紅色熒光?；罴毎€粒體膜電位高，線粒體內JC-1聚集體的濃度高，紅色熒光很強，在流式圖上表現為FL1和FL2雙陽性，而凋亡細胞則大多為FL1單陽性。 

線粒體膜電位檢測-流式法 

線粒體膜電位檢測-免疫熒光法 

結果展示 

JC-1熒光探針法（熒光顯微鏡觀察
流式檢測線粒體膜電位

實驗周期及交付標準 

1. 實驗周期：2-3周

2. 交付標準： 熒光顯微鏡拍照：熒光圖、熒光比值、實驗報告（實驗步驟、試劑、儀器） 流式檢測：流式檢測圖、比值、原始數據、實驗報告（實驗步驟、試劑、儀器）

需確認的信息

1. 樣本的種屬及類型（組織還是細胞）

2. 樣本數量

3. 是否提供探針

4. 拍照要求、分析要求

收費標準/服務周期/提供結果： 

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